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第10章 实验动物质量控制(7)

普通笼器具:是指不带有强制性空气净化装置的笼器具,它包括笼箱、笼架和饮水瓶。

净化笼器具:是指带有空气净化装置的特殊笼器具,包括独立通气笼盒(IVC)系统、层流架、隔离器、带空气过滤帽的塑料笼等。

135.实验动物笼器具制作原则有哪些?

实验动物笼器具制作必须符合下列几个原则:

(1)保证动物的健康、舒适:制作笼具的原材料要无毒。笼具要有可收容一定动物量的容积,符合动物要求的最小空间值。内外边角圆滑无毛刺,保证不损伤动物,尤其是足部。

笼具要有利于通风、散热,给动物以舒适的内环境。

(2)便于清洗和消毒:笼具应耐热、耐腐蚀。没有不易清理的死角。

(3)操作方便:笼具设计要便于搬运、清理、贮存,易于观察动物活动,在日常饲养和实验过程中,便于加料、喂水、更换垫料和抓取动物,不仅管理方便,亦可节约大量劳力。

(4)防止动物逃逸,坚固耐用,经济便宜:笼具最好设计为通用型,一种笼具可适应饲养多种动物。造价低,工艺简单,开启自如,防护可靠,不易损坏变形。

(5)笼具规格型号标准化:标准化的笼具既有利于动物饲养,也有利于维修和更换。

136.常见实验动物笼架主要有几种?

常见笼架有下面几种:

(1)饲养架:可把笼箱直接放于笼架的各层上,常用4~5层。

(2)悬挂式:将笼具悬吊在架子上,使粪尿落于托盘里,也可把动物笼箱直接悬挂于动物室墙壁的悬壁上。

(3)冲水式:又分为简易式和流水式。

1)简易式:在悬挂的笼子下面设有倾斜的冲洗槽,用水将粪尿冲洗到排水口处,冲洗槽需经常用刷子清洗。

2)流水式:笼架上装有水箱,笼下设有水槽,水槽呈S型,层层相连,水箱设有浮球控制一定的水位,利用人工或定时器使水箱里的水定时排放,利用水的落差将槽内的粪便冲入下水道。

(4)传送带式和刮板式:用传送带或刮粪板清理粪便。笼下装有传送带或刮板的传动机械。

笼架最好用不锈钢材制造。笼下冲洗槽或承受污物底板要耐冲洗、耐刮擦、耐腐蚀,可用金属、硬塑料、玻璃钢制造。自动清洗装置要尽可能减少噪声的发生,底部倾斜度要适中,光滑平整,不积水。

137.实验动物给料器、饮水器有何要求?

实验动物给料器按动物种类、笼箱、笼架不同有多种方式。大鼠、小鼠均采用固体饲料给料器,一般使用挂篮或在笼盖上做个凹形槽代替;豚鼠、兔、猴的给料器为箱型,悬挂于笼壁上;狗、猫的给料器是盘形或碗钵形。给料器的放置应适合动物采食,防止饲料散落,保证食物清洁。目前自动给料装置正在研制试用。

饮水卫生直接关系到实验动物的健康。不同级别的实验动物,其饮水的卫生标准是不一样的。对普通级动物来说,符合卫生标准的城市居民饮用水即可供其直接饮用。对于清洁级及其以上级别的实验动物来说,其饮用水必须经过高温高压灭菌处理。亦可应用酸化水(pH2.5~3.0)。给水设备必须按各级别实验动物的管理要求定期清洗消毒。饮水应每天更换,不要将饮水瓶由一个鼠盒随意移到另一个鼠盒上。

138.何谓隔离器?

隔离环境最主要设备是隔离器,这是一种可把微生物完全隔离于设施外,能够饲养无菌动物的设备。隔离器是保种及进行各种动物实验的最安全的设备。

隔离器由隔离器室、传递系统、操作系统、过滤系统、进出风系统、风机和支撑结构组成。

其结构模式如下:①隔离器室:动物所处的生存空间;②传递系统:动物、物品进出隔离器的通路;③操作系统:工作人员操作隔离器用的胶质手套及其与隔离器主体连接的部件;④风机:隔离器进出风所需的动力风机或供风系统;⑤过滤系统:过滤进出隔离器主体的空气的系统;⑥进出风系统:进出隔离器主体的风口及其管道;⑦支撑结构:隔离器本身的支撑及其他辅助部件。

制造隔离器的硬质和软塑料可选用无毒、耐酸、耐消毒、易清洗、不对动物形成生物危害的材料。一般多使用聚氯乙烯、不锈钢、玻璃钢、有机玻璃板和硬塑料等。

139.隔离器有哪几种类型?

(1)隔离器按其主体的制造材料可分为两种类型:①软质隔离器:主体由柔软塑料薄膜经热合密封而成,主体空间大小随通风而变化,主体内部应有可防止动物和软塑料直接接触的围护笼具;②硬质隔离器:主体由硬质材料一体成型或经密封焊接而成,主体空间大小不随通风而变化。

(2)隔离器随功能不同可分为饲养隔离器、动物实验隔离器和手术隔离器等。

(3)随应用动物品种不同可分为啮齿类、兔、鸡、猪、牛、羊等隔离器。

(4)随内部气体状况可分为正压、负压隔离器。通常软质隔离器只能形成正压,而硬质隔离器可有正、负压之分。除部分生物危害大的动物实验使用负压隔离器外,大部分都使用正压隔离器。

140.隔离器有哪些特点?

隔离器的维护要求简单,空间占有小,可用于高品质动物进行试验的特点,使其具有广泛的应用价值。

隔离器本身的环境控制主要通过对其所处外环境的调节而获取,本身除可能有红外线灯、加热板等局部调温辅助设备产生的调温功能外,很少有调控能力。其内部环境和所处外环境各种指标有一定差异,如温度、湿度、气流速度、气体成分及其分布均匀度,尤其是空间小,满负荷使用时间长,使其环境指标的变化极为明显,在环境控制和监控上有其独特之处,必须十分注意。

隔离器使用中,空气过滤器的过滤效率会逐步下降,无菌操作必须严格。维持一个良好的工作状态与管理水平的高低关系十分密切。

141.何谓超净饲养架?

超净饲养架,又叫层流架。层流架是一种小型屏障饲养器材,工作人员只需彻底消毒手臂,带灭菌手套即可操作。

层流和普通气流不同,是具有线性流向的气流。层流架有前过滤器和高效过滤器,通过送风系统或吸引系统形成正压或负压两种层流空气。内部没有气流的逆向流动。前者从架内吹出无菌无尘的层流空气,后者是室内空气由室内先进入饲育架,由吸引装置吸出污染空气,经过过滤净化后排出动物室外。层流架能维持接近屏障设施的微生物环境。成功地使用层流架饲养SPF动物的关键在于如何防止操作人员的手和动物接触所造成的污染问题。

层流架原则上只能维持短暂的清洁屏障。如果把层流架放入屏障系统内应用,将会使安全性能大大提高,这对较低过滤空气控程的屏障系统不失为一个可用的补偿措施。

142.何谓隔离柜?

隔离柜,是一种负压层流架的变化装备。采用有刚性强度的材料制成,用于感染动物的饲育,并防止将感染传给研究者。由吸气孔吸入室内空气,经前过滤器、高效过滤器、送气孔、通道,由给气管的小孔吸到各饲育区。饲育区可以是单间、多间或由几层组成,每层有几个完全分开的小间。污染的空气吸入背面小孔,进入背面贮气室,经过粗滤、高效过滤后排出隔离柜。其好处是可把每个小间的气流组织成独立体系,互不干扰,从而使动物安全地共同使用一个装备。

143.什么是独立通气笼盒(IVC)系统?

独立通气笼盒(IndividuallyVentilatedCages,IVC)系统,最早出现于20世纪80年代,是意大利Thcniplast公司在带空气过滤帽塑料盒的盒帽上方加了一个进风口,希望促进盒内的通风换气,从而出现了第一个独立通气笼盒系统。IVC系统的基本结构主要由初级过滤器、高效过滤器、风机、静压箱及控制电器组成的主机箱、含有密封良好的进排气管的架体以及IVC系统笼盒组成。现已研制、发展了多功能系列产品,适用清洁级以上动物饲养、实验。从2000年起,我国上海、苏州等地实验动物器材厂开发研制成功IVC系统,填补了国内实验动物器材的空白,江苏省质量技术监督局2006年12月1日已颁布实验动物笼器具——独立通气笼盒(IVC)系统DB32/T9722006江苏省地方标准。

144.何谓生物安全柜?

生物安全柜又称之为生物安全罩,是一种前开式负压通风柜,在动物实验设施中用于对感染动物进行尸检,更换垫料,从动物机体采集组织或体液样本,动物实验操作等。

145.生物安全柜分为几种等级?

我国生物安全柜标准有关部门正在组织专家起草制定,现以美国相关标准为指导,把生物安全柜分为三个等级,其中二级又分成A、B1、B2、B3四型。内容介绍如下:

Ⅰ级:用于人员安全与环境保护的通风安全柜,其向内的非循环吸入气流必须远离操作者,适用于对产品安全性无要求且生物危险度等级为1、2、3的病源的操作。

注意:安全柜中的气体在外排到大气以前必须先经过滤器过滤,以保护环境。

Ⅱ级:用于人员、产品安全与环境保护的通风安全柜,其位于前部开口,区域的向内吸入气流是为了保护人员安全;垂直气流经高效过滤器过滤是为了保护产品安全;为了保护环境,排出的气体须经过高效过滤器过滤。适用于生物安全度等级为1、2、3的病源的操作。

注意:当有毒化学物质或放射性核物质被用作微生物研究或制药的添加物时,应使用专为此设计制造的Ⅱ级生物安全柜。

Ⅱ级A型(以前称为1型):①维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速(计算或测量值)为0.38m/s(75ft/min);②由静压箱送出的,经高效过滤器过滤的垂直气流是垂直气流和吸入气流混合后的一部分(即:静压箱排出的气流一部分排出安全柜,余下部分供应工作区域);③允许排出口高效过滤器过滤后的气流排回实验室;④允许有正压的污染风道和静压箱。A型生物安全柜适用于没有挥发性有毒化学物质、挥发性放射性核素作为微生物学研究的添加剂,生物安全度等级为1、2、3的工作场合。

Ⅱ级B1型(以前称为2型):①维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速(计算或测量值)为0.5m/s(100ft/min);②经高效过滤器过滤后的垂直气流中的绝大部分是由未污染的循环吸入气流组成的;③经高效过滤器过滤后的大部分污染的垂直气流,通过专用风道排入大气;④所有被生物污染的风道和静压箱区保持负压,或被负压的风道和静压箱包围。B1型生物安全柜可适用于有微量挥发性有毒化学物质或衡量放射性核素作为微生物学研究的添加剂,生物安全度等级为1、2、3的工作场合,但是对这些化学物质和放射性核素的处理应在安全柜的直接排风区内,或者当垂直气流循环时,它们不会影响操作。

Ⅱ级B2型(有时称为“全排”型):①维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速(计算或测量值)为0.5m/s(100ft/min);②经高效过滤器过滤后的垂直气流是由实验室或室外空气送入的(即:安全柜中排出的气体不进入垂直气流的循环过程);③所有的吸入气流和垂直气流经高效过滤器过滤后排入大气,不再进入安全柜循环或返回实验室;④所有污染的风道和静压箱保持负压,或是被直接排风(工作区域不循环)的风道和静压箱包围。

B2型生物安全柜适用于使用挥发性有毒化学物质和放射性核素作为微生物学研究的添加剂,生物安全度等级为1、2、3的工作场合。

Ⅱ级B3型:①维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速(计算或测量值)为0.5m/s(100ft/min);②经高效过滤器过滤后的垂直气流是由静压箱排出的垂直气流和吸入气流混合后的一部分;③必须经高效过滤器过滤后,所有废气才能排到室外;④所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压或者被负压的风道和静压箱包围。当垂直气流循环时,如果化学物质或放射性核素不影响工作,则B3型生物安全柜可适用于有微量挥发性有毒化学物质或衡量放射性核素作为微生物学研究的添加剂,生物安全度等级为1、2、3的工作场合。

Ⅲ级:一个完全密闭的、不漏气结构的通风安全柜。在安全柜内的操作是通过与安全柜相连接的橡皮手套控制的。安全柜应维持至少120Pa的负压。送入气流经数个高效过滤器过滤送入安全柜。排出气流应经双层高效过滤器过滤或通过高效过滤器过滤和焚烧来处理。适用于生物安全度等级为1、2、3和4的病源的操作。

146.实验动物笼器具产品检测程序与检测方法有哪些?

(1)检测程序(图36):

(2)检测方法:

1)普通笼器具:①外观;②尺寸;③失落损伤试验;④耐高温高压试验;⑤焊点拉力测试;⑥饮水瓶密封性试验。

2)净化笼器具:除普通笼器要求外,应还有:①换气次数测定;②气流速度测定;③静压差测定;④落下菌测定;⑤空气洁净度测定;⑥噪声测定。

(3)生物学试验方法有:①异常毒性试验;②细胞毒性试验。

147.江苏省DB32/T9672006《实验动物笼器具——塑料笼箱》地方标准技术要求有哪些?

1)笼箱大小应满足各类实验动物饲育面积与空间。

2)箱体表面应光洁、平整、色泽均匀,不得凹陷、裂痕,耐高温、高压,灭菌50次后不变形,耐受冲击、无异常毒性。

3)配套网罩,表面应平整、边缘光滑、无毛刺,与箱体匹配。网罩钢丝间隔均匀整齐,间距为:小鼠(6.5±0.5)mm,大鼠、豚鼠、地鼠(8.5±1.0)mm。各类实验动物饲育不得逃逸,网罩钢丝焊点应能承受20N的静态拉力不断裂,不脱焊。

148.实验动物笼器具——塑料笼箱规定的质量检验方法是哪些?

(1)外观:手触,目测。尺寸:用钢尺、卷尺测量。

(2)耐冲击:将箱体端平,自1m高度自由跌落到水泥地面上,观察是否破损。

(3)耐温耐压:用蒸气消毒灭菌锅121℃灭菌30分钟,观察有否变形。

(4)耐酸碱:分别在pH2、pH10的溶液中浸泡24小时,观察有否腐蚀现象。

(5)焊点拉力:笼箱配套不锈钢网罩焊点处施加20N静态拉力20s,观察,应无断裂、脱焊现象。

(6)异常毒性试验:将一定剂量的供试液由静脉注入小鼠体内,在规定时间内观察小鼠有无毒性反应和死亡情况,以决定供试品是否符合规定的一种方法。

(7)检验规则:以每一个生产单元为一批,每批按1%随机抽取,最少不少于5个,逐项检验,检验如有不合格项进行复检,复检结果仍不合格,则该批产品不合格。

149.实验动物笼器具——塑料笼箱应如何提高发展形式?

应按实验动物微生物控制级别不同的笼箱产品,其发展形式可呈多样化,选择最适合的多聚物材料,研发生产一次性无菌笼箱(盒),并可具有降解实验动物氨浓度或能抑制部分外来微生物污染的功能,适用于小型活动动物实验室应用。

150.江苏省DB32/T9682006《实验动物笼器具——金属笼箱》地方标准技术要求有哪些?

(1)采用不锈钢材料,应符合GB/T4240规定,焊后手工抛光或电解抛光,要求色泽均匀一致。

(2)金属笼箱不锈钢丝、不锈钢管框直径、间距应符合DB32/T9682006附录B规定。

(3)笼箱应折叠方便,表面光滑、无毛刺。

(4)焊点应能承受20N的静态拉力20s,不断裂、脱焊。

(5)笼箱门应牢固、开启灵活,防止实验动物逃脱。

151.实验动物笼器具——金属笼箱规定的质量检验方法是哪些?

(1)外观:手触,目测。外形偏差、钢丝间隔、笼底栅格间距:用钢尺、卷尺测量。

(2)焊点拉力:在焊点处施加20N静态拉力20s,观察有无断裂、脱焊现象。

(3)检验规则:以每一个生产单元为一批,每批随机抽取1%笼箱供检验用,最少不少于2个产品检验。如有不合格项,允许在同批产品中加倍抽样对不合格项进行复检,复检结果仍不合格,则该批产品为不合格品。

152.实验动物笼器具——金属笼箱应如何提高发展形式?

应根据实验动物各类品种对笼箱的要求,大型金属笼箱发展要以贮存、洗刷消毒方便为主,超微型、可伸缩性,一定范围内自由调整,适用于小型活动实验室应用。

153.江苏省DB32/T9692006《实验动物笼器具——笼架》地方标准技术要求有哪些?

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